“上海滬鼎”文獻(xiàn)：脾多肽對(duì)非霍奇金淋巴瘤患者漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞功能及成熟的影響

凡治國(guó)，李志平，崔東海，任 超

( 安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院普內(nèi)科，河南 安陽(yáng) 455000)

［摘要］ 目的 探討脾多肽對(duì)非霍奇金淋巴瘤( NHL) 患者漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞( pDC) 功能及成熟的影響。方法  收集35 例NHL 患者外周血單個(gè)核細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀分選 pDC，用脾多肽刺激 pDC 5 d，顯微鏡觀(guān)察pDC 形態(tài)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) pDC 表型，掃描電鏡觀(guān)察 pDC 超微結(jié)構(gòu)，不同濃度的脾多肽處理24 h 后，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè) pDC 上清液中干擾素 － α( IFN-α) 、腫瘤壞死因子 － α( TNF-α) 和白介素 － 6( IL-6) 水平。以 35 例同期體檢健康志愿者作為對(duì)照。結(jié)果  經(jīng)不同濃度的脾多肽處理后，pDC 的表面突起逐漸明顯，隨著脾多肽濃度的增加，突起明顯變長(zhǎng)呈成熟特征;各濃度脾多肽組 pDC 上清液中 IFN-α、TNF-α、IL-6 水平均較脾多肽 0  mg·L － 1 組有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜ 0． 05) ，且隨著脾多肽濃度的增加而上升明顯，各濃度脾多肽組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜ 0． 05);各濃度脾多肽組 pDC 細(xì)胞的 CD11c、CD80、CD86 表達(dá)陽(yáng)性率均較脾多肽 0  mg·L － 1 組有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜ 0． 05) ，且隨著脾多肽濃度的增加而上升明顯，各濃度脾多肽組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜ 0． 05)。結(jié)論 脾多肽可以有效增強(qiáng) NHL 患者 pDC的功能，對(duì)其分化成熟有很好的促進(jìn)作用。

［關(guān)鍵詞］ 脾多肽;非霍奇金淋巴瘤;漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞

DOI: 10． 3969 / j． issn． 1673-5412． 2018． 03． 012

［中圖分類(lèi)號(hào)］ Ｒ733． 1 ［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］ A ［文章編號(hào)］ 1673 － 5412(2018)03 － 0221 － 04

非霍奇金淋巴瘤( non-hodgkin's  lymphoma，NHL)是一種發(fā)生于淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，B 細(xì)胞來(lái)源者占 85% 以上，在惡性淋巴瘤中 NHL 所占的比例遠(yuǎn)高于霍奇金病［1］。青壯年人群是 NHL 的高發(fā)人群，近年來(lái)的流行病學(xué)資料顯示其發(fā)病率和病死率逐年上升［2］。雖然放、化療技術(shù)取得很大的發(fā)展，但由于NHL 臨床特征變化多樣，病理類(lèi)型又非常繁雜，故臨床治療仍存在很多難題［3 － 4］。免疫功能缺陷是 NHL 發(fā)病的高危因素之一，免疫調(diào)節(jié)異常可能在 NHL 的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞( plasmacytoid dendritic cell，pDC) 是體內(nèi)專(zhuān)職性抗原呈遞細(xì)胞( antigen-presenting cell，APC) ，不僅激活初始型 T 細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答，而且能啟動(dòng) T 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，受細(xì)菌、病毒的刺激時(shí)產(chǎn)生一定數(shù)量的腫瘤壞死因子 － α( tumor necrosis factor-α，TNF-α) 和白介素 － 6 ( interleukin-6，IL-6) ，并逐漸向樹(shù)突狀細(xì)胞( dendritic  cell，DC) 分化，在機(jī)體免疫中起重要作用［5 － 6］。以 DC 為基礎(chǔ)的主動(dòng)免疫治療在腫瘤治療中受到人們重視，也成了目前研究的熱點(diǎn)。脾多肽是由多肽、游離氨基酸、核酸和總糖組成的一種 激活及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的藥物，對(duì)機(jī)體免疫有雙向 調(diào)節(jié)作用，具有調(diào)節(jié)免疫、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力、抗腫瘤及 提高骨髓造血功能等作用。目前尚沒(méi)有關(guān)于脾多肽對(duì)NHL 患者 pDC 功能及成熟的影響的報(bào)道，本研究采用流式細(xì)胞儀分選 pDC，用不同濃度的脾多肽刺激 pDC，觀(guān)察脾多肽對(duì)外周血來(lái)源的 pDC 功能及成熟的影響， 以期為 NHL 免疫治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1． 1    研究對(duì)象  選擇 2015 年 6 月至 2016 年 10 月我院收治的 35 例 NHL 患者作為研究對(duì)象，所有患者經(jīng)病理學(xué)檢查確診為 NHL，并處于緩解期。其中男 19例，女 16 例;年齡 15 ～ 59(30． 45 ± 12． 57) 歲;Ann  Ar-bor 分期:Ⅰa 期 8 例，Ⅱa 期 12 例，Ⅱb 期 7 例，Ⅲa 期4 例，Ⅲb 期 2 例，Ⅳa 期 2 例。對(duì)照組為同期體檢健康志愿者，男 20  例，女 15  例; 年齡 18  ～ 60 ( 35． 5  ±11． 5) 歲。

1． 2    儀器與試劑  FACSCalibur 流式細(xì)胞儀( 美國(guó)BD公司);JSM6510 掃描電子顯微鏡( 日本電子株式會(huì)社);JXP15 型光學(xué)顯微鏡( 上海光學(xué)儀器廠(chǎng));Bio-Ｒad Model 680 酶標(biāo)儀( 美國(guó) Bio-Ｒad 公司)。脾多肽注射液( 吉林豐生制藥有限公司，商品名: 澳蓮，批號(hào): 15021021); 干擾素 － α( interferon-α，IFN-α) 、TNF-α、IL-6 的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒均購(gòu)自上海滬鼎生物科技有限公司;胎牛血清、ＲPMI-1640  培養(yǎng)基、PBS 購(gòu)自上海哈靈生物科技有限公司;熒光標(biāo)志的單克隆抗體CD4-FITC、CD123-FE、CD11c-FITC、CD86-APC、BD- CA-2-APC、CD80-PeCy5 及同型對(duì)照 IgG1 FITC / IgG1 -PC5 購(gòu)自美國(guó) BD 公司。

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