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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

生長因子,人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號:bFGF-9

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時間:2015-12-23

產(chǎn)品簡介:

人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌R&D/美國

【名稱】:人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒

【規(guī)格】:48T/96T
【方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】: 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
【用途】:科研 實驗
【貯存】: 貯存于2℃-8℃.如有需要,我們將竭城為顧客提供售前,售中,售后的*服務(wù)!
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
4)加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
7)加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準確性。
數(shù)據(jù)計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒注意事項
1)實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2)加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復(fù)性。
3)孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4)反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5)建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋數(shù)。
6)建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒退換貨政策
若發(fā)生退換貨需求,請先致電客服人員。符合退換貨政策的,我司將與您簽訂退換貨協(xié)議,并根據(jù)協(xié)議進行退換貨。
特別說明,以下情況不予辦理退換貨:
1、客戶在訂購產(chǎn)品時請仔細確認后再行訂購,由客戶選型失誤而造成的退貨需求,我方不承擔任何責任。產(chǎn)品大多性質(zhì)較為特殊,存儲方式復(fù)雜,請用戶按照貯存條件說明妥善保存。
2、已超過受理期限的產(chǎn)品;
3、產(chǎn)品無標簽,或標簽已無法識別是否屬于我司試劑的產(chǎn)品;
4、密封產(chǎn)品原包裝打開,一次性封貼或膠條破損(質(zhì)量問題除外);
5、產(chǎn)品已使用(質(zhì)量問題除外);
6、由于您的操作原因、使用環(huán)境限成的誤報以及實際情況與您描述不符,我司將不予受理申請退貨;
7、涉及產(chǎn)品退回,客戶需要與我們客服人員并按照相關(guān)指導(dǎo)操作運輸事宜。

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