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基礎信息Product information
產品名稱：
ELISA試劑盒,兔子白介素10ELISA試劑盒
產品型號：IL-10
廠商性質：生產廠家
所在地：上海市
更新時間：2016-05-31
產品簡介：
“兔子白介素10（IL-10）ELISA試劑盒"全程提供和購買保障,讓您放心購買,安心使用.
產品特性Product characteristics
| 品牌 | R&D/美國 |
|---|
中文名稱：“兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒”
組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。
規格：96T/48T
性狀：液體
保存：2-8℃
有效期：6個月
ELISA試劑盒的性能：
準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/ml。
特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
“兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒”操作說明
1．試劑盒保存：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正?，F象，不會對實驗結果造成任何影響。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品（240 ng/L） | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
120 ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
60 ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
30 ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
15 ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
7.5 ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
ELISA試劑盒的優點體現：
·特異性高：進行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數據誤差。
·精 度 高：通過加標回收率和線性稀釋實驗，確保樣本值的準確性，精確度高于同類產品（較低的CV%）。
·重復性好：lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異。
·可靠性強：經優化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽性和假陰性試驗結果。
·標準曲線：在保證精準數據的前提下提供較寬的檢測范圍，以滿足需求。
·價格低廉：*RD試劑，國內分裝配置，大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產試劑盒的顧慮。
正確操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件
1. 加樣后及時放人孵箱，標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。
2. 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
3. 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4. 合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
“兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒”標本處理
1、 只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
2、 實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
3、 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
4、 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致 ELISA實驗結果偏差。
5、 若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素 較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
6、 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
7、 建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏 差。
