產品型號：

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2017-12-26

產品簡介：

豬一氧化氮（NO）ELISA試劑盒技術指導

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中豬一氧化氮（NO）的含量。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬一氧化氮（NO）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬一氧化氮（NO）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

豬一氧化氮（NO）ELISA試劑盒技術指導主要優點

 1.高效、靈敏、特異的抗體；

 2. 穩定的重復性和可靠性；

 3. 吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

 4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；

 5. zui大限度的節省實驗經費。

常用的使用方法

一、雙抗體夾心法測定抗原

將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;

加抗原，形成抗原-抗體復合物;

加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;

加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);

加底物。底物的降解量＝抗原量。

二、直接法測定抗原

將抗原吸附在載體表面；

加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；

加底物。底物的降解量＝抗原量。

三、間接法測定抗體

將抗原吸附于固相載體表面；

加抗體, 形成抗原-抗體復合物；

加酶標抗體；

加底物。 測定底物的降解量＝抗體量。

問題解答

靈敏度是什么意思？

根據我司多年來的銷售經驗，我司了解到客戶針對購買Elisa試劑盒時，靈敏度要求非常高。這是為什么呢？為您解析Elisa試劑盒靈敏度。Elisa試劑盒靈敏度高能使產品達到一定的數值，對產品試驗有著非常大利益，它能檢測到的分析物的zui小量，表示檢測下限的能力。

相對靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%

測定方法及表示方法：靈敏度標準品、質控血清、陽性標本稀釋終點、血清盤（pannel）及臨床標本陽性率。

靈敏度標準品可以從衛生部臨檢中心購買，質控血清可以從衛生部臨檢中心購買，也可以自己配制。因為質控血清不一定是原倍血清，或由于片段、亞型、位點等原因，評定試劑盒的靈敏度都帶有一定的片面性。

陽性標本稀釋終點的方法常用于不同試劑盒的比較，但也有上述的片面性。陽性pannel有些可以從衛生部臨檢中心購買，如HBsAg陽性pannel，也可以自己配制。臨床標本陽性率，是一種粗略的估計，但對臨床很實用。

注意事項

1. 由于產品底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應將酶標儀打開，將其預熱30min以上。

3. 孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

4. 要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

結果計算：

在半對數坐標紙上繪制標準曲線。標準品的濃度為X軸，相應的OD值為Y軸，用四參數或對數-對數法繪制zui合適的標準曲線。濃度與OD值成反比關系，隨著標準品濃度的增加，黃色強度就減少，即OD值減少樣本濃度可直接從標準曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋，則試劑盒zui后結果應乘以相應的稀釋因子標準曲線為逆向S型曲線。

附：采用全自動酶標儀檢測，只需檢測前設置好酶標儀的相關參數，如坐標參數（線性，半對數）和計算方式參數（三次回歸、四參數或雙對數曲線方程），即可直接得到結果。

產品名稱存放：收到貨后貯存于4℃，強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內密封起來，貯存于4℃，已稀釋的標準品，生物標記物，抗體和HRP貯存于4℃。